pda培养基如何配置_PDA培养基的配制方法 环球观点

1、PDA培养【yǎng】基的【de】配方土豆 200g葡萄糖 20g琼脂 15～20g水 1000mLpH值 自然PDA培养基的配制称量【liàng】和熬煮 按培养基配方逐一称取【qǔ】去皮【pí】土豆。

2、土豆切成小块放【fàng】入锅中，加水1000ml，在加热器上加热【rè】至【zhì】沸【fèi】腾，维持20-30min，用可用2层【céng】纱布趁【chèn】热在量杯上【shàng】过滤，滤渣【zhā】弃取。

3、滤液补充水分到1000ml。

(资料图)

4、加热【rè】溶解 把滤液【yè】放入锅【guō】中，加【jiā】入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前【qián】搞【gǎo】碎)，然后放在【zài】石棉网上，小火加热【rè】，并用玻棒不【bú】断搅【jiǎo】拌，以防琼脂糊底或溢出【chū】，待琼脂完全【quán】溶解后，再【zài】补充水【shuǐ】分至【zhì】所【suǒ】需量。

5、分装 按实【shí】训要求，将配【pèi】制的培【péi】养基分装入【rù】试【shì】管或500ml三角瓶内。

6、分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

7、分装量：固体培养【yǎng】基约为试管高度【dù】的1/5，灭菌后制【zhì】成【chéng】斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的【de】一半【bàn】为【wéi】宜;半固体培养基【jī】以试管高度的【de】1/3为宜【yí】，灭菌后垂直待凝。

8、加棉塞 培【péi】养基分【fèn】装完毕后，在试管口或【huò】三角【jiǎo】烧瓶【píng】口上塞上【shàng】棉塞(或泡【pào】沫塑料塞或试管【guǎn】帽等【děng】)，以阻止外界微生物进入【rù】培养基内造【zào】成污染，并【bìng】保证【zhèng】有良好的通气性能。

9、包【bāo】扎 加塞后，将【jiāng】全部【bù】试管用麻绳或橡皮筋【jīn】捆好，再在棉【mián】塞外包一层牛皮【pí】纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞【sāi】，其外再【zài】用一道线绳或【huò】橡【xiàng】皮【pí】筋扎好，用记号【hào】笔【bǐ】注【zhù】明培养基名称、组别、配制日期【qī】。

10、棉塞制【zhì】作说明棉塞【sāi】的作用：一是防【fáng】止杂【zá】菌【jun1】污染;二【èr】是可过滤空【kōng】气【qì】，保证通气良【liáng】好，并可减【jiǎn】缓培养基水分的蒸发，所以【yǐ】正确地制备【bèi】棉塞是培养基制备中重要的一环。

11、正确的棉塞是形状【zhuàng】、大【dà】小，松紧应与试管口(或三角烧瓶【píng】)完【wán】全适合。

12、过紧【jǐn】则妨碍【ài】空气流通【tōng】，操作不便;过【guò】松【sōng】时，空气会【huì】毫无【wú】障碍地【dì】进入试管(或三角烧瓶)中，达【dá】不到灭菌的目【mù】的。

13、棉塞【sāi】过小往往易掉进【jìn】试管内，因此【cǐ】棉【mián】塞质量【liàng】的【de】优劣对实训的结果有很大的【de】影响。

14、正确的棉塞头【tóu】较大，加塞【sāi】时【shí】，应使棉塞长度【dù】的1/3留在试管口外，2/3在试管【guǎn】口内。

15、目前，有【yǒu】条件的实【shí】训室已【yǐ】使用坚固的塑【sù】料试管帽、金属试管【guǎn】帽【mào】、硅【guī】胶泡沫塞替代【dài】棉塞【sāi】，制作棉塞要选纤【xiān】维较长的棉花【huā】，一般不选用脱脂棉。

16、因为它容易吸水变湿，造成污染，而且价格也贵。

17、PDA培养【yǎng】基【jī】配制注意事项【xiàng】培养基经【jīng】灭菌后，必须【xū】放在37C温箱培养24h，无菌生长者【zhě】方可使用。

18、PDA培养基一般不需要调pH。

19、对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH。

20、如果培养基偏酸或偏碱【jiǎn】时，可用【yòng】lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调【diào】节。

21、调节时应逐滴【dī】加【jiā】入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸或过【guò】碱破坏培养基成分。

22、培养基在使用【yòng】时【shí】也可以做【zuò】成【chéng】不含【hán】琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡【dàng】培【péi】养。

23、培养基也可【kě】以【yǐ】加【jiā】入氯霉素或土霉素【sù】，加入【rù】量【liàng】为【wéi】0.2g/L培养基，主要是为了【le】抑制细菌的生长，减少干扰性。

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